檢測技術(shù)服務(wù):如何測定蛋白泛素化含量

檢測技術(shù)服務(wù):如何測定蛋白泛素化含量--檢測技術(shù)服務(wù)詳情

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蛋白泛素化是指泛素（Ubiquitin）通過泛素化激活酶、結(jié)合酶、連接酶（E1-E2-E3）的級聯(lián)反應(yīng)連接到靶蛋白的賴氨酸殘基上，其涉及8種不同的泛素鏈連接類型（M1、K6、K11、K27、K29、K33、K48和K63）。蛋白質(zhì)泛素化在細(xì)胞周期、信號傳導(dǎo)、蛋白降解等生理過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，通過測定蛋白泛素化含量可了解生物體內(nèi)蛋白泛素化修飾的生理功能及影響。

在泛素化蛋白含量測定過程中，泛素化修飾的蛋白被胰蛋白酶消化為小片段肽鏈，在泛素化溪水肽鏈的賴氨酸的修飾位點(diǎn)上產(chǎn)生兩個甘氨酸的殘基（K-GG），采用賴氨酸泛素化抗體富集泛素化修飾肽鏈。富集得到的泛素化蛋白肽鏈?zhǔn)褂没谫|(zhì)譜的非標(biāo)記（Label-free）定量和標(biāo)記（Label）定量技術(shù)測定蛋白泛素化含量，其中基于質(zhì)譜的標(biāo)記定量檢測包括基于串級質(zhì)譜報告離子定量的iTRAQ和TMT定量檢測技術(shù)。

百泰派克公司采用Thermo Fisher的質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusion質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC技術(shù)，提供泛素化定量蛋白組分析服務(wù)技術(shù)包裹，您只需將樣品寄出并將實(shí)驗(yàn)?zāi)康母嬖V我們，我們會負(fù)責(zé)項(xiàng)目后續(xù)所有事宜，包括蛋白提取、蛋白酶切、泛素化肽段富集、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學(xué)分析。

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