ip蛋白磷酸化位點質(zhì)譜鑒定

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IP蛋白磷酸化位點質(zhì)譜鑒定就是指利用質(zhì)譜技術(shù)對免疫沉淀下來的蛋白質(zhì)進行磷酸化位點鑒定。免疫沉淀技術(shù)是分析蛋白質(zhì)相互作用的常用技術(shù)，其利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理來尋找與目的蛋白相互作用的靶蛋白。IP獲得的靶蛋白可以通過質(zhì)譜技術(shù)后續(xù)分析，即IP-MS分析，主要是對其進行定性和定量鑒定，表征其翻譯后修飾情況。

利用IP-MS鑒定蛋白磷酸化位點要通過IP獲得靶蛋白，將靶蛋白進行多重酶切，再將富集的磷酸化肽段進行液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析，由于磷酸化的肽段相比沒有磷酸化的肽段分子質(zhì)量剛好增加了一個磷酸基團的值，根據(jù)肽段質(zhì)譜數(shù)據(jù)對肽段的分子質(zhì)量進行分析可以實現(xiàn)靶蛋白的磷酸化位點鑒定。

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