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                江蘇食品伏馬毒素含量檢測機構

                品牌: GFQT
                周期: 5-7個工作日
                檢測范圍: 全國
                單價: 700.00元/件
                發貨期限: 自買家付款之日起 天內發貨
                所在地: 江蘇 蘇州
                有效期至: 長期有效
                發布時間: 2023-12-18 09:15
                最后更新: 2023-12-18 09:15
                瀏覽次數: 287
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                發布企業資料
                詳細說明

                檢測方法標準依據:GB 5009.食品安全國家標準 食品中伏馬毒素的測定

                1.范圍

                本標準規定了玉米及其制品中伏馬毒素B1、伏馬毒素B2、伏馬毒素B3(以下簡寫為FB1、FB2、FB3)的測定方法。

                本標準**法為免疫親和柱凈化柱后衍生高效液相色譜法,第二法為高效液相色譜-串聯質譜聯用法,第三法為免疫親和柱凈化柱前衍生高效液相色譜法,適用于玉米及其制品中伏馬毒素的測定。

                **法 免疫親和柱凈化-柱后衍生高效液相色譜法

                2.原理

                樣品用乙腈水溶液提取,經稀釋后過免疫親和柱浄化,去除脂肪、蛋白質、色素及碳水化合物等干擾物質。經高效液相色譜分離后柱后鄰苯二甲醛衍生,熒光檢測,外標法定量。

                3.試劑和材料

                除非另有說明,本方法使用的試劑均為分析純,水為GB/T 6682規定的一級水。

                3.1 試劑

                3.1.1 甲醇(CH3OH):色譜純。

                3.1.2 乙腈(CH3CN):色譜純。

                3.1.3 乙酸(CH3COOH)。

                3.1.4 氫氧化鈉(NaOH)。

                3.1.5 氯化鈉(NaCl)。

                3.1.6 磷酸氫二鈉(Na2HPO4)。

                3.1.7 磷酸二氫鉀(KH2PO4)。

                3.1.8 氯化鉀(KCl)。

                3.1.9 硼砂(Na2B4O7·10H2O)。

                3.1.10 2-巰基乙醇(C2H6OS)。

                3.1.11 鄰苯二甲醛(OPA,C8H6O2)。

                3.1.12 吐溫-20(C58H114O26)。

                3.2 溶液配制

                3.2.1 甲酸水溶液(0.1%):吸取1mL甲酸,加入到999mL水中,混合均勻。

                3.2.2 乙腈-水溶液(50+50):分別量取500mL乙腈和500mL水,混合均勻。

                3.2.3 乙腈-水溶液(20+80):分別量取200mL乙腈和800mL水,混合均勻。

                3.2.4 甲醇-乙酸溶液(98十2):吸取2mL乙酸,加入到98mL甲醇中,混合均勻。

                3.2.5 氫氧化鈉溶液(lmol/L):準確稱取氫氧化鈉4.0g,溶于100mL水,混合均勻。

                3.2.6 磷酸鹽緩沖液(PBS):稱取8.0g氯化鈉、1.2g磷酸氫二鈉、0.2g磷酸二氫鉀、0.2g氯化鉀,用980mL水溶解,用鹽酸調整pH至7.4,用水稀釋至1000mL,混合均勻。

                3.2.7 吐溫-20/PBS溶液(0.1%):吸取1mL吐溫-20,加入磷酸鹽緩沖液(3.2.6)并稀釋至1000mL,混合均勻。

                3.2.8 硼砂溶液(0.05mol/L,pH10.5):稱取硼砂19.1g,溶于980mL水中,用氫氧化鈉溶液調pH至10.5,用水稀釋至1000mL,混合均勻。

                3.2.9 衍生溶液:稱取2.0g鄰苯二甲醛,溶于20mL甲醇中,用硼砂溶液(0.05mo/L,pH10.5)(3.2.8)稀釋至500mL,加入2-巰基乙醇500μL,混勻,裝入棕色瓶中,現用現配。

                3.3 標準品

                3.3.1 伏馬毒素B1(FB1,C34H59NO15),純度≥95%,或有證標準溶液。

                3.3.2 伏馬毒素B2(FB2, C34H59NO14),純度≥95%,或有證標準溶液。

                3.3.3 伏馬毒素B3(FB3,C34H59NO14),純度≥95%,或有證標準溶液。

                3.4 標準溶液配制

                3.4.1 標準儲備溶液(0.1mg/mL):分別準確稱取FB1、FB2、FB3各0.01g(**至0.0001g)至小燒杯中,用乙腈-水溶液(3.2.2)溶解,并轉移至100mL容量瓶中,定容至刻度。此溶液密封后避光-20℃保存。有效期6個月。

                3.4.2 混合標準溶液:準確吸取FB1標準儲備液1mL、FB2和FB3標準儲備液0.5mL至同一10mL容量瓶中,加乙腈-水溶液(3.2.2)稀釋至刻度,得到FB1濃度為10μg/mL、FB2和FB3濃度為5μg/mL的混合標準溶液。再稀釋10倍,得到FB1濃度為1μg/mL、FB2和FB3濃度為0.5μg/mL的混合標準溶液。此溶液密封后避光4℃保存,有效期6個月。

                3.4.3 混合標準工作溶液:準確吸取混合標準溶液,用乙腈-水溶液(3.2.3)稀釋,配制成FB1濃度依次為20ng/mL、80ng/mL、160ng/mL、240ng/mL、320ng/mL、400ng/mL,FB2和FB3濃度依次為10ng/mL、40ng/mL、80ng/mL、120ng/mL、160ng/mL、200ng/mL的系列混合標準工作溶液。

                4.儀器和設備

                4.1 高效液相色譜儀,帶熒光檢測器。

                4.2 柱后衍生系統。

                4.3 天平:感量0.01g和0.0001g。

                4.4 均質器。

                4.5 振蕩器。

                4.6 氮吹儀。

                4.7 離心機:轉速≥4000r/min。

                4.8 免疫親和柱(柱容量≥5000ng,FB1柱回收率≥80%)(柱容量及柱回收率驗證方法參見附錄B)。

                注:對于每個批次的親和柱在使用前需進行質量檢驗。

                4.9 微孔濾膜:0.45μm,有機型。


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